Procédure d’autopsie et Prélèvements biologiques

Sur le terrain, en l’absence de hotte aspirante, il est préférable de pratiquer les autopsies en extérieur, sous un abri, pour être protégé du soleil ou de la pluie, mais ouvert aux quatre vents pour bénéficier d’une aération maximale.

Les « curieux » doivent être maintenus à distance, hors d’atteinte de projections de liquides ou d’aérosols.

Le personnel en charge des autopsies doit être correctement protégé : gants, masque, lunettes

Préparation à l'autopsie (cliquer pour agrandir)

1. Poser l’animal sur le dos sur la planche d’autopsie recouverte d’une feuille de papier
2. L’épingler sur la planche par les 4 membres écartés.
3. Passer un tampon imbibé d’éthanol sur l’abdomen
4. Avec un ciseau fort pratiquer une incision depuis les organes génitaux jusqu’au sternum, de façon à accéder à la cavité générale.

De l’avant du corps vers l’arrière :

5. Le cœur est alors accessible pour pratiquer une ponction cardiaque à l’aide d’une seringue: le sang peut ensuite être déposé sur une lame (frottis, goutte épaisse), déposé sur un sérobuvard, conservé dans un tube Eppendorf pour centrifugation et récupération du sérum.
6. Les premiers organes visibles sous le diaphragme, sur la masse du tractus digestif sont le foie et la rate : ils peuvent être prélevés immédiatement.
7. Le foie doit être retourné et examiné sous toutes ces facettes pour déceler la présence de parasites (kystes, granulations, etc.) Les kystes (ténias en général) seront prélevés et conservés en éthanol 70 °. Si le foie présente des lésions, un aspect granuleux, on peut en découper une partie et la fixer (formol, bouin, etc.)
8. Prélèvement du Tractus digestif : sectionner le TD au niveau du rectum, le dérouler* en tirant délicatement avec des pinces sur les adhérences blanchâtres qui relient les différentes parties entre elles, au besoin les sectionner avec un ciseau fin ; sectionner l’autre extrémité du TD à la jonction œsophage-estomac. Placer le TD dans un tube étanche contenant de l’éthanol 70° pour recherche ultérieure de parasites .

* : Le TD doit impérativement être déroulé avant fixation, de façon à pouvoir analyser aisément et séparément les différentes parties (rectum, caecum, intestin grêle, etc .) et ainsi localiser les parasites. Non déroulé, le TD sera fixé en bloc par l’éthanol.

9. Le TD enlevé, permet d’accéder plus facilement aux autres organes : on peut alors prélever le cœur, les poumons, les reins et les conserver en éthanol 90° pour analyses génétiques, dans du RNAlater ou congelés en azote liquide pour recherches de virus
10. Observation des organes génitaux

Males :

• Noter le stade de développement des vésicules séminales, éventuellement les mesurer ou les peser
• Mesurer la plus grande longueur des testicules

Femelles - noter l’aspect de l’utérus :

• Filiforme, couleur uniforme, sans taches rougeâtres ou noires = femelle n’ayant encore eu de portée.
• Large, a paroi épaissie, avec points brun foncé ou noirs = cicatrices placentaires, femelle ayant déjà mis bas
• Présence d’embryons : on note le nombre par branche de l’utérus , éventuellement le nombre de ceux qui seraient en résorption ( nettement plus petits que les autres) , on mesure la plus grande longueur de l’ampoule fœtale (= plus grande longueur de l’embryon in situ).